Как называется тест на спид
Диагностика ВИЧ: методы и исследования
Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.
Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.
Важность клинической диагностики ВИЧ
В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют. Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает. С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно. Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.
Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди. Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован. Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.
Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.
Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ
Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам. Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования. Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.
Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:
Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования. Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.
Современные методы диагностики ВИЧ
В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:
Также могут быть применены следующие методики:
Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.
Все о тесте на ВИЧ: когда делать и какой лучше?
Скрининговые и подтверждающие тесты. Иммуноблоттинг, ИФА и ПЦР. Точность экспресс-тестов и адреса для анонимного тестирования.
У каждого есть ВИЧ-статус, только у одних он положительный, а у других — отрицательный. Однако знать его необходимо, особенно в российских реалиях, когда в стране эпидемия, и уже более одного процента населения живет с вирусом.
Для диагностики вируса иммунодефицита человека существует несколько видов тестов, причем их классификация сложна лишь на первый взгляд, на самом деле она весьма логична. Главное — помнить, что, несмотря на высокую точность анализов, ни один тест не найдет вирус сразу после заражения.
Скрининговые (поисковые) тесты
Они помогают заподозрить инфекцию, но их результаты надо подтверждать другими анализами. Для скрининга используют тесты либо на антитела, либо на антигены/антитела.
ИФА (иммуноферментый анализ).
Этот метод служит не для обнаружения самого вируса, а антител, которые наша иммунная система вырабатывает для борьбы с ним.
Существует несколько поколений ИФА:
Современный ИФА четвертого поколения позволяет обнаружить антитела, появляющиеся в крови с 30-го (цифры согласно клиническим рекомендациям Минздрава) дня инфицирования (по данным Центра контроля и профилактики заболеваний в США CDC — c 23 по 90 день). Он проводит комбинированный анализ, одновременно проверяя: есть ли в крови белковые «обломки» ВИЧ (антигены), а также антитела.
За счет своей простоты и дешевизны этот метод используется чаще всего, в том числе на его основе работают экспресс-тесты.
Подтверждающие тесты
Как следует из названия, они позволяют наверняка убедиться в наличии или отсутствии вируса иммунодефицита у человека. Их минус в сложности и дороговизне.
Иммуноблоттинг помогает проверить результаты скрининговых анализов и уточнить, каким видом вируса инфицирован человек: ВИЧ-1, ВИЧ-2 или обоими. Этот метод обладает высокой точностью, чувствительностью, но дорог и сложен в исполнении. Он является комбинацией ИФА и электрофореза, что позволяет определить антитела к специфическим антигенам ВИЧ-1 (gp160, gp120, gp41).
ПЦР (полимеразная цепная реакция). Тест способен находить генетический материал ВИЧ (ДНК/РНК), то есть проверяет, есть ли непосредственно вирус в крови. Нуклеиновые кислоты могут обнаруживаться уже на 7-й день после инфицирования (по данным CDC — c 10 по 33 день).
Кроме того, ПЦР бывает качественным и количественным. В последнем случае можно отслеживать вирусную нагрузку (концентрацию вируса в крови и других биологических жидкостях) у людей с ВИЧ, оценивая эффект терапии.
А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?
Иммуноблот используют специальные лаборатории центров по борьбе со СПИДом. Пробы крови направляются туда для перепроверки уже положительных первичных скрининговых анализов. Сразу сдать его не получится, даже в платных клиниках.
ПЦР, наоборот, можно сдать в любой момент, но только обратившись в коммерческую лабораторию. В СПИД-центрах его делают также для перепроверки ранее положительного теста. Да, ПЦР позволяет максимально быстро (в течение 7—10 дней после инфицирования) обнаружить ВИЧ, но и у него есть недостатки:
Точность большинства экспресс-тестов при хронической (длительно текущей) ВИЧ-инфекции достаточно высока (> 99 % чувствительности и специфичности), но все равно чуть ниже лабораторных анализов.
Сегодня среди них наиболее популярны тесты слюны (или околодесневой жидкости) и крови. Их можно либо купить самому, либо получить бесплатно в ВИЧ-сервисных организациях.
Важно помнить! Если такой тест оказался положительным, результат необходимо как можно быстрее перепроверить более точным методом.
Где я могу сделать тест на ВИЧ анонимно и бесплатно?
Можно пойти в местный СПИД-центр, кабинеты анонимного консультирования или в некоммерческие организации (например, фонд «СПИД.ЦЕНТР» Адрес: ул. Нижняя Сыромятническая д. 11 к 1, офис 313). Или в Центре-СПИД по Московской области (ул. Щепкина, 61/2, корп.8).
Анализ на ВИЧ бесплатный и анонимный, прикрепление к поликлинике и регистрация не требуются. После сдачи теста выдается идентификационный номер, по которому можно будет узнать результат.
Как называется тест на спид
ВИЧ – вирус семейства ретровирусов, поражающий иммунитет человека. Является единственной причиной развития СПИД.
Существует 2 вида вируса:
Сегодня для диагностики заболевания применяются современные тест-системы, способные определить наличие патогена уже спустя 2 недели после попадания в организм. Еще недавно единственным способом диагностики заболевания были тест-системы первого поколения, с помощью которых можно было обнаружить вирусные клетки только спустя 6-12 недель после попадания в организм.
Современный комбинированный ВИЧ-анализ имеет целый ряд преимуществ. Основным является возможность обнаружения данным тестом вируса уже через 1-4 недели с момента заражения, до сероконверсии. Это в разы сокращает «период окна» и позволяет оказать необходимую медицинскую помощь своевременно.
Данный анализ также способен выявить в крови антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, которые вырабатываются в достаточном количестве для определения тест-системой уже через 2-8 недель с момента заражения. Это помогает идентифицировать, каким именно типом вируса заражен человек.
Примечательно, что на терминальной стадии СПИД-тест на антитела к ВИЧ может давать отрицательный результат. Это связано с нарушением механизма выработки антител.
Основные стадии ВИЧ-инфекции
Инкубационный период ВИЧ-инфекции еще называют «период серонегативного окна». Так называется период с момента инфицирования до выработки в крови защитных антител к вирусу. В это время тесты на антитела к ВИЧ будут давать отрицательный результат, однако человек уже является распространителем инфекции. Данный период может длиться от 2 недель до 6 месяцев в зависимости от индивидуальных особенностей организма.
Период острой ВИЧ-инфекции наступает через 2-4 недели с момента попадания патогена в организм и длится приблизительно 2-3 недели. В этот момент у некоторых пациентов возникают слабые проявления заболевания, схожие с симптоматикой гриппа, что на самом деле свидетельствует об активной репликации вируса. Однако в подавляющем большинстве случаев латентная стадия заболевания протекает без каких-либо симптомов. В этот период стабильно снижается иммунитет, значительно увеличивается количество вирусных клеток в крови. СПИД – это конечная стадия развития ВИЧ-инфекции. Синдром приобретенного иммунодефицита человека характеризуется сильным угнетением иммунной системы, а также возникновением сопутствующих патологий, среди которых энцефалопатия, онкологические заболевания.
На данный момент не существует лекарства от ВИЧ-инфекции – заболевание неизлечимо. Однако разработана эффективная антиретровирусная терапия, которая значительно улучает качество жизни инфицированного пациента.
Назначение теста
Данный вид исследования имеет большое диагностическое значение в том случае, если заражение произошло незадолго до момента тестирования. С помощью ранней диагностики можно взять под контроль дальнейшее распространение заболевания. Также это поможет вовремя начать прием специальных лекарств, способных остановить прогрессирование ВИЧ-инфекции.
Показания к исследованию
Существует ряд ситуаций, в которых пациенту в обязательном порядке назначается тест на ВИЧ:
Расшифровка анализа на ВИЧ
Наибольшая вероятность информативной диагностики ВИЧ наступает через 12 недель после заражения. В данный период концентрация антител достаточная, чтобы обнаружить их в 95% случаев. К примеру, через месяц после заражения вероятность их обнаружения составляет всего 60-65%.
В случае, если человек получил положительный результат анализа на ВИЧ, рекомендуется повторно провести анализ – желательно, несколько раз. Крайне рекомендуется проводить его другими способами, чтобы точно подтвердить или опровергнуть наличие заболевания, ведь нередко результаты исследования получаются ложноположительными.
Результат считают положительным в том случае, если два анализа, проведенных на разном оборудовании различными методиками, обнаруживают антитела к ВИЧ в крови.
Тайна двух полосок. Как работают тесты на ВИЧ?
Даниил Давыдов
После выхода известного фильма Дудя большинство ВИЧ-сервисных НКО захлестнула волна желающих провериться. В том числе и СПИД.ЦЕНТР — поток клиентов увеличился почти втрое, а на тестирование пришли люди, раньше никогда не посещавшие открытого пространства фонда на Artplay.
Впрочем, и сам Дудь в помещении нашего фонда протестировался, эти кадры есть в фильме. Белой лопаточкой с пластиковой ручкой он проводит по деснам, затем предъявляет результат — одна полоска. «Здоров!»
Ввиду большого интереса публики, в том числе и клиентов, дошедших до нашего лофта на Нижней Сыромятнической, сегодня мы рассказываем, как устроены эти и другие тесты на ВИЧ. Почему на ручке тестера появляются полоски, насколько такое тестирование достоверно и надежно, а главное — какие альтернативы ему существуют.
Все, что вы хотели узнать о технологии тестирования на ВИЧ-инфекцию, — в одном материале.
Коротко о вирусе ВИЧ и ИФА
Все анализы на ВИЧ предназначены для того, чтобы либо разыскать части вируса, либо зафиксировать реакцию организма на его присутствие. Поэтому, чтобы понять, как работают тесты на ВИЧ, нужно примерно представлять, как устроен вирус и как он себя ведет, оказавшись в клетке.
Вирус ВИЧ — член семейства ретровирусов (Retroviridae). Представители этого семейства выглядят как крохотные круглые частицы, у которых есть оболочка, усеянная особыми белками. При помощи этих белков вирус распознает клетку-жертву и прикрепляется к ней.
Затем оболочки клетки и вируса сливаются, а внутрь клетки попадает содержимое вируса — нуклеокапсид. Нуклеокапсид — это белковая капсула, внутри которой находятся генетическая информация об устройстве вируса — две копии двухцепочечной РНК — и набор ферментов, которые «включают» РНК, когда та окажется в клетке. После слияния вируса с клеткой нуклеокапсид открывается, РНК и вирусные ферменты попадают внутрь, а сам вирус начинает свое черное дело.
Тестов на ВИЧ очень много, но их можно разделить на несколько больших типов. Те экспресс-тесты, которыми пользуются большинство ВИЧ-сервисных НКО, устроены по принципу иммуноферментного анализа, или ИФА.
Их задача — определить антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение в него вируса.
Как это работает? Когда вирус ВИЧ попадает в организм, иммунная система человека не сидит без дела. Она начинает продуцировать антитела — иммунные белки, которые помогают организму бороться с инфекцией. Эти белки можно обнаружить во многих биологических жидкостях.
Способов обнаружения таких антител существует много. Но наиболее популярным считается именно иммуноферментный анализ (ИФА). За рубежом этот тест называется enzyme-linked immunosorbent assay, сокращенно — ELISA.
Почему две полоски?
Принцип ИФА основан на реакции «антиген-антитело». У человека берут кровь или жидкость с десен (это не совсем слюна), в которой могут находиться антитела к вирусу ВИЧ.
Затем к ней добавляют реактив с белками вируса ВИЧ, а вернее, антигенами, но не простыми, а «доработанными». Антиген, который используют в реакции, отличается от обычного вирусного белка тем, что к нему «прицепили» химическую метку.
Пока «меченые» антигены плавают в реактиве сами по себе, ничего не происходит. Но если в биологической жидкости есть антитела к ВИЧ, то они соединятся с «мечеными» антигенами и дадут сигнал, который может засечь лаборант или экспресс-тест. Если антител к ВИЧ нет — сигнала не будет.
В экспресс-тестах, которые используются фондом СПИД.ЦЕНТР и многими другими нашими коллегами для бесплатного и анонимного тестирования, антитела тонкой линией нанесены на специальную поверхность, спрятанную под пластмассовым корпусом тестера.
Сначала клиент промокает десневую жидкость лопаточкой, установленной на конце тестера. А как только жидкость собрана, лаборант опускает лопаточку в реагент, который в течение 15 минут поднимается по тестеру, достигая в итоге полоски с антигенами.
Если антитела в десневой жидкости, смешанной с реагентом, были — полоска краснеет.
Как правило, на ручке тестера имеется и вторая полоса — контрольная, она окрашивается в красный всегда. Так что, как правило, отрицательный результат (вируса в организме нет) маркируется одной полоской на рукоятке тестера, а положительный (вирус в организме есть) — двумя.
Две полоски на тестере — это верный признак того, что человек некоторое время назад получил ВИЧ-инфекцию. А стало быть, клиенту срочно нужно обратиться к врачу за терапией — в областной или городской центр СПИД. Там ему будут назначены подтверждающие анализы и прописана антиретровирусная терапия.
Точно такой же тест (ИФА), только лабораторный, можно сделать и во многих коммерческих клиниках — но за деньги. Технология его в целом выглядит так же, а точность отличается незначительно.
Какие бывают тесты ИФА?
● «Домашний» экспресс-тест — OraQuick HIV ½ Rapid Antibody Test. Материал для теста — жидкость, которую собирают с десен специальной мягкой щеточкой. Тест выдает результат очень быстро: в течение 20 минут.
● Лабораторный ИФА-тест — анализ на ВИЧ по форме 50. В нашей стране его применяют в качестве стандартной процедуры лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Материал для анализа — кровь из вены, которую нужно сдавать в лаборатории. Результаты приходят через 1—5 дней.
Что важно знать об ИФА-тестах?
У всех ИФА-тестов есть два серьезных недостатка. Во-первых, ИФА-тесты не определяют вирус ВИЧ сразу после инфицирования. Так происходит, потому что антитела к вирусу ВИЧ вырабатываются не сразу. Современные ИФА-тесты позволяют «засечь» иммунные белки только через 23—90 дней после заражения. Если сдать анализ до этого срока, можно попасть в «серологическое окно» — так называется время, в течение которого иммунная система еще не успела создать антитела к вирусным белкам, хотя вирус в организме уже есть.
Во-вторых, ИФА-тесты на ВИЧ иногда дают ложноположительные результаты — то есть «находят» вирус ВИЧ у людей, у которых его на самом деле нет. Лабораторный ИФА-тест на ВИЧ может ошибаться так же, как и экспресс. Именно поэтому все положительные ИФА-тесты, как правило, подлежат проверке при помощи более надежных методов. В нашей стране с этой целью применяют вестерн-блоттинг.
Подтверждающие тесты: вестерн-блоттинг (WB)
Цель этого теста — подтвердить результаты первичного анализа.
Вестерн-блоттинг можно провести только в лаборатории. Такие тесты не бывают «карманными», именно поэтому все НКО, которые тестируют граждан на ВИЧ, в итоге отправляют своих клиентов в лаборатории центров СПИД сдавать именно этот анализ, если экспресс-тестер показал положительный результат.
Вестерн-блоттинг (или иммуноблот) по технологии — тот же ИФА-анализ, основанный на реакции «антиген-антитело», только очень точный, долгий и кропотливый.
Чтобы провести анализ, у человека берут кровь и добывают из нее сыворотку. Это все та же кровь, только без эритроцитов, иммунных клеток и всего остального, что может образовывать сгустки крови. Потом эту сыворотку наносят на полоску из нитроцеллюлозы, на которой в строгом порядке размещены различные антигены ВИЧ — белки из оболочки и нуклеокапсида вируса. Если в сыворотке крови уже успели появиться антитела, они свяжутся с антигенами, размещенными на полоске.
Потом к смеси добавляют новый реактив-«проявитель». Как и в фотографии, этот реактив нужен, чтобы понять, прошла реакция или нет. В реактиве-«проявителе» находятся антитела, помеченные химической меткой. Но это антитела не к антигенам вируса ВИЧ, а к человеческим антителам, которые умеют связываться с комплексом «антиген-антитело».
Если в образце есть комплекс «антиген-антитело», на полоске проявятся окрашенные полосы. Каждая полоска означает свой вирусный белок. Реакция считается очень точной — в большинстве случаев вестерн-блоттинг позволяет исключить случайное срабатывание теста.
Какие бывают тесты этого типа? Разные. Некоторые позволяют подтвердить наличие вируса ВИЧ-1, некоторые — ВИЧ-2, а некоторые — обоих вариантов вируса сразу.
Пример: российская тест-система ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2. Эта тест-система участвует в тендерах — закупках в государственные лаборатории, которые действуют при СПИД-центрах.
Что важно знать о вестерн-блоте?
В России вестерн-блоттинг считается золотым стандартом подтверждения ВИЧ-инфекции. Проблема заключается в следующем.
1. Вестерн-блоттинг все равно иногда дает неопределенный результат. В этой ситуации тест придется пересдать, причем только через три недели.
2. Вестерн-блоттинг дорогой и долгий. Тест требует сложного оборудования, кропотливой работы и квалифицированного персонала. А чтобы разобраться с результатами, нужна помощь эксперта.
В чем проблема с российскими анализами на ВИЧ?
В нашей стране для подтверждения ВИЧ-статуса используют лабораторный ИФА-тест и вестерн-блоттинг — это стандартная процедура. Однако Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отмечает: в странах, где действует эта схема, на определение ВИЧ-статуса тратится очень много времени и средств. Причем ожидание результата настолько изматывает, что некоторые пациенты даже жалеют о решении узнать свой ВИЧ-статус.
Эксперты ВОЗ советуют отказаться от лабораторных ИФА-тестов и вестерн-блоттинга в пользу комбинированных экспресс-тестов, которые дают быстрый и более надежный результат. И это действительно работает.
Например, в США от «подтверждающего» инфекцию вестерн-блоттинга в принципе отказались. И для определения, и для подтверждения ВИЧ-статуса в этой стране используют комбинированные лабораторные и экспресс-тесты. Это не только дешевле для государства, но и психологически проще для людей: поскольку время ожидания меньше, а сама процедура — проще, все больше американцев вовремя узнают свой ВИЧ-статус и начинают своевременное лечение.
Комбинированные тесты
Цель комбинированных тестов, как и вестерн-блоттинга, — определить ВИЧ-статус человека.
Они представляют собой тот же анализ ИФА, но усовершенствованный — «два в одном». Тест позволяет определить не только человеческие антитела к вирусу ВИЧ, но и вирусный антиген — белок p24. Из этого белка состоит внутренняя оболочка вируса — нуклеокапсид, о котором мы говорили выше.
Комбинированные тесты на ВИЧ тоже бывают «домашними» и лабораторными.
● Пример «домашнего» комбинированного экспресс-теста — анализ Alere HIV Combo. Этот анализ можно сделать по крови из пальца (по сыворотке тоже, но годится и «простая» кровь), а результаты известны уже через 20 минут.
● Пример лабораторного комбинированного теста — HIV Ag/Ab Combo, который делают в частных лабораториях за деньги.
Что важно знать об этом тесте? Этот анализ относится к четвертому поколению. На сегодняшний день во всем мире именно он считается оптимальным способом выявления инфекции, потому что недорог и позволяет относительно рано узнать ВИЧ-статус клиента.
Если речь идет об определении ВИЧ-статуса, то в Европе и США чаще всего прибегают именно к комбинированным тестам. Если тест дает положительный результат, нет необходимости проводить подтверждающий анализ, его просто через некоторое время сдают повторно — и это считается достаточно надежным.
Дело в том, что антиген — вирусный белок р24 — появляется в крови уже в первую неделю после заражения, то есть задолго до того, как вырабатываются антитела. Поскольку комбинированный тест определяет антиген, шанс узнать свой статус есть уже через 21—28 дней после предполагаемого инфицирования.
После того как начинают вырабатываться антитела, вирусный белок р24 из крови пропадает. Иногда это происходит уже на вторую неделю, но у 90—95 % инфицированных людей антитела появляются в крови в первые три месяца после заражения.
Предсказать, когда именно появятся антитела, невозможно, ведь организм каждого человека по-своему реагирует на вирус ВИЧ. Но даже если антиген р24 из крови успеет исчезнуть, комбинированный тест найдет если не р24, то как минимум антитела, и все равно даст верный ответ.
ПЦР: самый сложный анализ
Тесты, позволяющие определить непосредственно генетический материал вируса ВИЧ, называются полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), при помощи которой можно определять вирус ВИЧ, существует много. Но понять, что именно происходит в пробирке, проще всего на примере ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
по теме
Общество
Две полоски. Как живут в Москве ЛГБТ-беженцы из Узбекистана
Этот тест позволяет обнаружить РНК вируса ВИЧ в крови. Если немного упростить, то реакция выглядит следующим образом. Сначала в сыворотку, содержащую РНК вируса, добавляют фермент, который «собирает» вирусную ДНК, используя РНК в качестве матрицы, — то есть проделывает почти то же самое, что и вирус, попавший в клетку.
Затем проводят стандартную ПЦР — реакцию, позволяющую увеличить концентрацию ДНК в образце до величин, которые уже можно без труда зафиксировать. Для этого к получившейся ДНК добавляют нуклеотиды — «кирпичики», из которых строится ДНК, — и фермент, который собирает из этих нуклеотидов вторую ДНК-цепочку. Чтобы фермент сработал, все это нагревают до определенной температуры и повторяют множество раз — до тех пор, пока не наберется достаточно ДНК. В таком виде тест можно использовать для определения ВИЧ-статуса человека.
Реакцию ПЦР-ОТ можно провести в режиме реального времени. Это помогает достаточно точно понять, сколько вирусных частиц находится в организме. Обычно для этого в реакционную смесь добавляют кусочек ДНК, помеченный химическим веществом, которое начинает светиться, когда кусок ДНК встраивается в молекулу. Так как этот кусочек ДНК подходит только к одному участку вирусной ДНК, можно подсчитать количество вспышек и понять, сколько же вирусной РНК первоначально было в образце.
Видео: как работает ПЦР-тест
Какие бывают тесты ПЦР? Полимеразная цепная реакция — это чисто лабораторный тест. Экспресс-тестов, основанных на ней, не бывает — ведь в момент, когда ДНК «достраивается», смесь нужно нагревать. А для того чтобы «прочитать» результат, требуется дорогостоящее оборудование.
ПЦР-ОТ — очень чувствительный тест, который способен определять даже очень небольшое количество вируса в крови. Причем достаточно рано: так как при анализе не нужно ждать появления в крови антител и вирусных белков, он «сработает» уже через несколько дней или недель после контакта с ВИЧ.
Но тест этот очень дорогой и сложный. Впрочем, это не единственная причина, по которой его не используют для определения ВИЧ-статуса для всех, хотя и это можно сделать в частной лаборатории за деньги. Дело в том, что тест подходит для определения только одного типа вируса — ВИЧ-1. ВИЧ-2 он не находит. Поэтому анализы ПЦР на ВИЧ обычно используют только для контроля лечения человека, который уже знает свой ВИЧ-статус.